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HILIC色譜柱原理:是一個吸附與解吸的平衡

  hilic柱的原理
  
  HILIC色譜柱是親水相互作用色譜柱,其保留模式類似于正相,同時又突破了正相模式的溶劑局限。
  
  分離原理:采用反相流動相體系,而按照正相順序出峰。通過親水性相互作用,可有效的分離反相色譜柱中因保留能力弱而難分離的強(qiáng)極性化合物。是一種分離機(jī)理,而具備這種分離機(jī)理的鍵合相種類非常多。在HILIC中,固定相是極性的,流動相中的水相部分表現(xiàn)為強(qiáng)洗脫溶劑,這與傳統(tǒng)的反相色譜法完全相反。
  
  waters hilic色譜柱說明書
  
  1.避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內(nèi)的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內(nèi)填料,因此,在調(diào)節(jié)流速時應(yīng)該緩慢進(jìn)行,在閥進(jìn)樣時閥的轉(zhuǎn)動不能過緩。
  
  2.應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成,特別是反相色譜中,不應(yīng)直接從有機(jī)溶劑改變?yōu)槿渴撬?,反之亦然?/span>
  
  3.一般說來色譜柱不能反沖,只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時,才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖會迅速降低柱效。
  
  4.選擇使用適宜的流動相(尤其是pH),以避免固定相被破壞。有時可以在進(jìn)樣器前面連接一預(yù)柱,分析柱是鍵合硅膠時,預(yù)柱為硅膠,可使流動相在進(jìn)入分析柱之前預(yù)先被硅膠“飽和”,避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。
  
  液相遇到大極性物質(zhì)時,如何選色譜柱,是AQ還是HILIC?
  
  優(yōu)先選擇HILIC色譜柱,AQ色譜柱只是在反相填料基礎(chǔ)上增強(qiáng)對極性分子的保留,但改善效果有限,而HILIC則是基于親水作用的分離機(jī)理,使得大極性物質(zhì)也可以在色譜柱上保留。
  
  hilic色譜柱使用注意事項(xiàng)?
  
  1.使用前要先進(jìn)行清潔,避免污染樣品;
  
  2.在安裝柱子時要特別注意,要將柱子安裝完全,以免漏液;
  
  3.使用時應(yīng)按要求操作,不能過大的壓力,以免損壞柱子;
  
  4.使用時要加入正確的溶劑,以免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果;
  
  5.使用時要加入合適的溫度,以免損壞柱子;
  
  6.使用完畢后要將柱子清洗干凈,以免影響下次使用。


發(fā)布于: 2023-07-10
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