??????? 高效液相色譜(HPLC) 是一種流行且用途廣泛的技術(shù)，可為復(fù)雜有機(jī)樣品的成分的分離、鑒定和定量提供經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的解決方案。了解各個(gè)組成部分以及每個(gè)組成部分如何有助于分析的整體可靠性非常重要。
??????? 一、高效液相色譜及其部件介紹
系統(tǒng)主要組成部分為：
泵
探測(cè)器
根據(jù)應(yīng)用產(chǎn)生無(wú)限數(shù)量的其他配置。比如流動(dòng)相、色譜柱、管線、保護(hù)柱等
??????? 二、什么是高效液相色譜？
??????? HPLC 是一種用于分離、鑒定和量化混合物中成分的技術(shù)。特別適用于不易揮發(fā)、熱不穩(wěn)定和高分子量的化合物。
1、流動(dòng)相
液相以恒定速率泵送到裝有固定相的柱中。在進(jìn)入色譜柱之前，分析樣品被注入載流中。
在到達(dá)色譜柱時(shí)，基于分析物分子和固定相之間的物理化學(xué)相互作用，樣品組分被選擇性地保留。
流動(dòng)相用于將樣品輸送至系統(tǒng)。流動(dòng)相的基本標(biāo)準(zhǔn)是對(duì)樣品組分的惰性。通常使用純?nèi)軇┗蚓彌_液組合。流動(dòng)相應(yīng)不含顆粒雜質(zhì)并在使用前脫氣。流動(dòng)相的顆粒雜質(zhì)去除是非常重要的，在流動(dòng)相進(jìn)入系統(tǒng)前使用恒譜生多階溶劑吸濾頭進(jìn)行過濾，多種尺寸型號(hào)可選符合各種品牌的液相系統(tǒng)。并且不會(huì)將空氣引入系統(tǒng)內(nèi)部，溶劑利用率高達(dá)99.9%。
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2、流動(dòng)相容器
這些是用于流動(dòng)相儲(chǔ)存和運(yùn)輸?shù)亩栊匀萜?。一般采用透明玻璃瓶，便于目測(cè)容器內(nèi)流動(dòng)相液位。內(nèi)部提供不銹鋼微粒過濾器，用于去除流動(dòng)相中的微粒雜質(zhì)（如果有）。
3、泵
流動(dòng)相流速的變化會(huì)影響樣品組分的洗脫時(shí)間并導(dǎo)致誤差。泵在恒定壓力下為色譜柱提供恒定流量的流動(dòng)相。
4、進(jìn)樣器
進(jìn)樣器用于向流動(dòng)相流中提供恒定體積的樣品注入。進(jìn)樣的惰性和可重復(fù)性對(duì)于保持高精度水平是必要的。
5、液相色譜柱
色譜柱是一個(gè)重要組成部分，應(yīng)按照供應(yīng)商的說(shuō)明進(jìn)行適當(dāng)維護(hù)，以便在運(yùn)行后獲得重現(xiàn)性和分離效率。通常C18柱用途最為廣泛，可分析多種化合物。恒譜生色譜柱在硅膠基質(zhì)表面、孔徑和化學(xué)鍵合基團(tuán)又進(jìn)行了優(yōu)化，專門為快速分析進(jìn)行了一些優(yōu)化設(shè)計(jì)，例如孔徑增大，比表面積變小，因此分離更快速、高效，使其非常適合UHPLC、LC/MS/MS儀器分析。
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6、柱溫箱
分析運(yùn)行期間溫度的變化會(huì)導(dǎo)致分離的洗脫組分的保留時(shí)間發(fā)生變化。柱溫箱使用空氣循環(huán)保持恒定的柱溫。這確保了流動(dòng)相通過色譜柱的恒定流速。
7、探測(cè)器
檢測(cè)器對(duì)液相色譜柱分離的組分提供特定響應(yīng)，并提供所需的靈敏度。它必須獨(dú)立于流動(dòng)相組成的任何變化。盡管基于其他檢測(cè)技術(shù)的檢測(cè)器如今也很流行，但大多數(shù)應(yīng)用都需要 UV-VIS 檢測(cè)。
發(fā)布于: 2022-04-29