? ? ? ?高效液相色譜是一個(gè)需要多個(gè)步驟的復(fù)雜過(guò)程，所有這些步驟都需要無(wú)縫地協(xié)同工作才能從樣品中獲得準(zhǔn)確且可重復(fù)的結(jié)果。分析實(shí)驗(yàn)室使用同一臺(tái)儀器設(shè)備在一定有限的時(shí)間內(nèi)處理大批量樣品和處理不同性質(zhì)的樣品，樣品類型或樣品制備方法和使用的材料之間的細(xì)微差別會(huì)影響最終的結(jié)果。想要確保過(guò)濾裝置中的材料與溶劑之間的相容性可以最大限度地減少問(wèn)題，這就需要一致的過(guò)濾。選擇具有合適孔徑和截留特性的過(guò)濾裝置有助于確保有效去除微粒，而選擇合適尺寸和設(shè)計(jì)的過(guò)濾裝置有助于最大限度地減少樣品損失。良好的過(guò)濾還有助于保護(hù)色譜柱，并可能延長(zhǎng)進(jìn)樣器和色譜柱的使用壽命。
一、為什么要為HPLC預(yù)過(guò)濾樣品：
? ? ? ?處于對(duì)儀器性能和數(shù)據(jù)質(zhì)量的擔(dān)憂，通常使用的預(yù)防措施之一是將樣品預(yù)過(guò)濾，在將樣品加載到儀器之前對(duì)其進(jìn)行過(guò)濾，通常使用注射器過(guò)濾以確保它不含任何可能損壞進(jìn)樣器或弄臟進(jìn)樣器的顆粒物質(zhì)柱子。因?yàn)轭w粒污染會(huì)導(dǎo)致懸浮顆粒堵塞色譜柱篩板從而導(dǎo)致壓力增加和數(shù)據(jù)質(zhì)量下降，這一般可以直接通過(guò)更換色譜柱來(lái)解決。當(dāng)然，更換色譜柱需要考慮到成本和維護(hù)儀器時(shí)的停機(jī)時(shí)間。
二、過(guò)濾可保護(hù)泵：
? ? ? ?從泵的角度來(lái)看，理想的溶劑絕對(duì)不含顆粒物質(zhì)的。顆粒會(huì)干擾止回閥球和閥座之間的密封界面使得其泄漏或完全失效，從而導(dǎo)致泵流量不一致或無(wú)流量。微粒還會(huì)加速泵活塞和密封件的磨損導(dǎo)致泄漏和流量不準(zhǔn)確。這些問(wèn)題通常表現(xiàn)為嘈雜或不規(guī)則的基線、泵的操作壓力的意外波動(dòng)以及保留時(shí)間的變化。
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三、過(guò)濾可保護(hù)色譜柱：
? ? ? ?在HPLC中通常使用的填充柱顆粒之間的間隙大小是顆粒本身直徑的一小部分，所以液相色譜分析柱的填充床本身也可以充當(dāng)有效的過(guò)濾器起過(guò)濾作用。色譜柱末端的篩板有兩個(gè)作用：它們將顆粒保留在色譜柱內(nèi)防止流動(dòng)相攜帶的顆粒進(jìn)入并部分阻塞流經(jīng)顆粒床。顆粒在色譜柱入口側(cè)的玻璃料上的積聚也會(huì)導(dǎo)致玻璃料堵塞。
四、過(guò)濾可延長(zhǎng)HPLC儀器組件的使用壽命：
? ? ? ?考慮到盡管是極低水平的樣品污染也會(huì)給儀器帶來(lái)一些問(wèn)題，所以在加載之前預(yù)過(guò)濾樣品是一個(gè)簡(jiǎn)單、快速且成本低廉的步驟，可以大大改善HPLC的分析檢測(cè)結(jié)果。樣品預(yù)過(guò)濾延長(zhǎng)了昂貴且對(duì)質(zhì)量至關(guān)重要的儀器組件（包括泵、進(jìn)樣器和色譜柱）的使用壽命。
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? ? ? ?過(guò)濾器的選擇是成功的關(guān)鍵。使用錯(cuò)誤的濾膜可能會(huì)導(dǎo)致樣品污染或其他損壞，從而對(duì)結(jié)果產(chǎn)生負(fù)面影響。不同的流動(dòng)相需要不同的過(guò)濾膜，以確保不需要的物質(zhì)不會(huì)從膜中浸出并進(jìn)入樣品中。不同的樣品還需要不同的膜，以確保分析物不會(huì)被膜束縛，并在進(jìn)樣前從樣品中去除或減少。
?? ? ? 今天恒譜生分享的知識(shí)先到這啦，希望對(duì)您的工作有所幫助！
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發(fā)布于: 2022-12-09