? ? ? ? 以“清潔”流動(dòng)相將樣品輸送至液相分析柱對(duì)于穩(wěn)健的方法和高質(zhì)量的結(jié)果非常重要。過(guò)濾器與高效液相色譜 (HPLC) 儀器的正確、可靠運(yùn)行有關(guān)。
? ? ? ? 過(guò)濾器和過(guò)濾的主題在 LC 中非常重要，因?yàn)槿绻鲃?dòng)相流路中存在微粒，LC 系統(tǒng)中的許多組件很容易過(guò)早失效。例如，從溶劑瓶中抽出的流動(dòng)相中的灰塵或其他顆粒會(huì)導(dǎo)致泵止回閥部分失效（它們會(huì)泄漏）或完全失效（泵根本不產(chǎn)生流量）。最明顯的故障模式可能是進(jìn)樣樣品中的顆粒物或儀器組件在色譜柱入口處積聚，從而導(dǎo)致色譜柱堵塞。
? ? ? ? 一、保護(hù)泵：
? ? ? ? 從 LC 泵的角度來(lái)看，理想的溶劑絕對(duì)不含顆粒物。微粒會(huì)干擾止回閥球和閥座之間的密封界面，導(dǎo)致其泄漏或完全失效，從而導(dǎo)致泵的流量不一致或沒(méi)有流量。顆粒物還會(huì)加速泵活塞和密封件的磨損，從而導(dǎo)致泄漏和流速不準(zhǔn)確。這些問(wèn)題通常表現(xiàn)為噪聲或不規(guī)則的基線、泵報(bào)告的工作壓力的意外波動(dòng)以及保留時(shí)間的變化。
? ? ? ? 將恒譜生多階不銹鋼進(jìn)樣口過(guò)濾器安裝在溶劑管路的入口端，可將溶劑從儲(chǔ)液罐中抽出。三階液相吸濾頭：孔徑20um，配3種內(nèi)徑管（2mm、2.5mm、3mm）；一階液相吸濾頭：孔徑20um，配1/8”管；一階液相吸濾頭：孔徑20um，配1/16”管。
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? ? ? ? 二、過(guò)濾成本與泵問(wèn)題導(dǎo)致的成本：
? ? ? ? 如果可以通過(guò)使用液體添加劑和高質(zhì)量試劑將與泵相關(guān)的溶劑相關(guān)問(wèn)題的風(fēng)險(xiǎn)降至最低，則與內(nèi)部過(guò)濾相關(guān)的成本可能會(huì)超過(guò)與泵相關(guān)的成本泵停機(jī)時(shí)間。另一方面，如果您的實(shí)驗(yàn)室 24/7 全天候運(yùn)行并且泵的穩(wěn)定性至關(guān)重要，那么您可以選擇優(yōu)先考慮內(nèi)部溶劑過(guò)濾，以最大限度地延長(zhǎng)儀器的正常運(yùn)行時(shí)間。
? ? ? ? 三、過(guò)濾過(guò)程中引入化學(xué)和生物污染物的風(fēng)險(xiǎn)：
? ? ? ? ?如今，非常高質(zhì)量的膜過(guò)濾器可用于過(guò)濾本身不太可能污染溶劑的 LC 溶劑。但是，過(guò)濾器只是過(guò)濾過(guò)程的一個(gè)組成部分。必須正確清潔過(guò)濾設(shè)備的其余部分，以避免將顆粒和化學(xué)污染物帶入過(guò)濾的溶劑。這種方法肯定是可行的，但它依賴于訓(xùn)練有素的操作員、標(biāo)準(zhǔn)操作程序和尊重清潔的實(shí)驗(yàn)室文化。這個(gè)化學(xué)和生物污染物問(wèn)題對(duì)于專注于痕量水平測(cè)定的方法尤其重要，因?yàn)楫?dāng)使用非常靈敏的檢測(cè)器時(shí)，污染物將被視為噪聲或干擾物 (5,6)。
? ? ? ? 四、在線過(guò)濾器與保護(hù)柱
? ? ? ? 在 LC 儀器中，在線過(guò)濾器通常是放置在流動(dòng)相流路中泵出口和色譜柱入口之間某個(gè)點(diǎn)的過(guò)濾器。這些過(guò)濾器經(jīng)過(guò)多年的發(fā)展，性能最高的過(guò)濾器可以在非常高的壓力下使用，通孔尺寸小（低至 0.2 μm），內(nèi)部體積在微升范圍內(nèi)，以限制對(duì)峰值的貢獻(xiàn)擴(kuò)大。這些過(guò)濾器的唯一目的是收集流動(dòng)相中的微粒，以防止這些微粒損壞下游組件。有些實(shí)驗(yàn)人員不經(jīng)常在泵后立即使用在線過(guò)濾器，但非常嚴(yán)格地在帶有聚合物轉(zhuǎn)子密封件的閥門之間使用它們（例如，自動(dòng)進(jìn)樣器和柱切換閥）和分析柱。實(shí)驗(yàn)人員發(fā)現(xiàn)這些密封件在磨損時(shí)會(huì)脫落大量顆粒，而使用在線過(guò)濾器捕獲它們通常會(huì)延長(zhǎng)我們的分析柱和小直徑毛細(xì)管連接管的使用壽命。
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? ? ? ? 更換過(guò)濾器的成本從幾美元到 25 美元不等，具體取決于它們的功能，但如果我們可以顯著延長(zhǎng)分析柱的使用壽命并提高儀器的整體穩(wěn)定性，更換其中的一些是很容易的。
? ? ? ? 保護(hù)柱本質(zhì)上是分析柱的非常短的版本（通常具有相同的填充材料和直徑，但長(zhǎng)度約為 5 或 10 mm），擰入柱入口。有人可能會(huì)認(rèn)為保護(hù)柱也可以用作顆粒過(guò)濾器來(lái)保護(hù)分析柱，但這種方法的成本要高得多（每根保護(hù)柱大約是色譜柱購(gòu)買價(jià)格的 10-20%）。相反，保護(hù)柱更適合用于分析柱的化學(xué)保護(hù)。例如，被分析柱高度保留的樣品成分，或者在實(shí)驗(yàn)條件下甚至不會(huì)被洗脫的樣品成分，可以被保護(hù)柱捕獲。在對(duì)一些樣品進(jìn)行分析后，可以用新的保護(hù)柱更換被污染的保護(hù)柱，價(jià)格僅為新分析柱的一小部分。
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? ? ? ? 在本期“LC 故障排除”中，恒譜生盡可能概括了何時(shí)以及為何進(jìn)行過(guò)濾。當(dāng)然，在某些特殊情況下，這些概括并不適用。例如，某些類型的檢測(cè)器，例如用于聚合物分析的光散射檢測(cè)器，對(duì)流動(dòng)相中的微粒非常敏感，可能需要對(duì)流動(dòng)相溶劑進(jìn)行更徹底和更一致的過(guò)濾。LC 用戶應(yīng)仔細(xì)考慮與他們的特定分析相關(guān)的特殊要求，并相應(yīng)地調(diào)整他們使用過(guò)濾器和過(guò)濾的方法。
發(fā)布于: 2022-07-29